Comparação de duas técnicas parasitológicas na detecção de enteroparasitos em catadores no sul do Brasil / The comparison between two parasitological techniques for the detection of enteroparasites in waste pickers from the south of Brazil

Alguns pesquisadores e laboratórios clínicos utilizam apenas uma técnica para detecção de parasitos intestinais, podendo isto subestimar os achados. Enteroparasitos afetam principalmente populações com vulnerabilidade social, como os catadores. Alguns destes trabalhadores se reúnem em cooperativas, melhorando a condição de trabalho e o rendimento mensal, porém ainda não é o adequado, sendo por vezes insalubre. Nosso objetivo foi verificar a prevalência de enteroparasitos e comparar duas técnicas parasitológicas em suas medidas de efeito em catadores de material reciclável que trabalhavam em cooperativas no Sul do Brasil. Três amostras de fezes de 48 catadores, de seis cooperativas, foram coletadas em dias alternados, para a análise de parasitos. Duas técnicas de concentração de amostra foram utilizadas (Faust e Ritchie) e testadas para verificação da melhor a ser utilizada. A prevalência de parasitos em catadores foi de 62,5% (30/48) utilizando as duas técnicas em paralelo, sendo que quando utilizadas sozinhas, essa prevalência foi menor. Diagnosticaram-se helmintos e protozoários, tanto patogênicos quanto comensais. A partir da análise estatística, provou-se que as técnicas parasitológicas fornecem melhores resultados quando utilizadas em paralelo, ou seja, quando utilizamos as duas técnicas juntas e em três amostras de fezes.

Some researchers and clinical laboratories use just one technique for the detection of enteroparasites, allowing substandard findings. Enteroparasites mostly affect the socially vulnerable population, like the waste pickers. Some of these workers are gathered in cooperatives where work conditions and monthly wage are better. However, this environment is still not adequate being, sometimes, unsanitary. The objective was to study the enteroparasite prevalence and compare the two parasitological techniques in their effect measure in recyclable waste picker who were working in cooperatives in the south of Brazil. Three stool samples from 48 pickers from six cooperatives were collected in alternate days for parasite analysis. Two sample concentration techniques were used (Faust and Ritchie) and tested to verify which was the best to use. The parasite prevalence in waste picker was 62.5% (30/48), using the two techniques concurrently. When used individually, the prevalence was lower. Commensal and pathogenic helminths and protozoan were diagnosed. From the statistical analysis, it was proved that the parasitological techniques provide better results when used concomitantly, that is, when using the two techniques at the same time in three stool samples.

Toxoplasma gondii: IgG E IgM em pacientes oncológicos na região sul do Rio Grande do Sul, Brasil / Toxoplasma gondii: IgG and IgM in cancer patients in southern Rio Grande do Sul

A toxoplasmose é uma zoonose causada pelo protozoário Toxoplasma gondii, que produz infecções oportunistas em pacientes imunocomprometidos. O objetivo deste trabalho foi verificar a positividade para anticorpos IgG e IgM para T. gondii em pacientes portadores de neoplasias que realizaram tratamento quimioterápico no Hospital Escola da Universidade Federal de Pelotas e no Centro de Radioterapia e Oncologia da Santa Casa de Misericórdia de Pelotas. A sorologia para a detecção de anticorpos foi realizada em 77 amostras por meio da técnica de Eletroquimioluminescência. Verificou-se que a taxa de soropositivos para anticorpos IgG foi de 90,9% e de 7,8% para IgM. De acordo com a análise dos fatores de risco, foi constatada entre os soropositivos para IgG anti-T.gondii diferença significativa (p<0,05) apenas na variável idade. Os resultados obtidos indicam a necessidade de um controle sorológico dos pacientes em tratamento quimioterápico para evitar consequências graves e até mesmo fatais.

Estudo ambispectivo de coorte da cisticercose bovina em abatedouros com Serviço de Inspeção Municipal (SIM) na região sul do Rio Grande do Sul, Brasil / Ambispectivo cohort study of bovine cysticercosis in slaughterhouses with municipal inspection service (SIM) in southern Rio Grande do Sul, Brazil

No período de 2009 a 2013, os abatedouros com Serviço de Inspeção Municipal (SIM) do municípiode Pelotas-RS abateram 15.408 bovinos, identificando-se 389 com cisticercose, o que representou aprevalência média de 2,5 por cento. A distribuição temporal da prevalência revelou as maiores frequências,com diferenças significativas, nos meses de maio e dezembro, com uma razão de chances (OR) de1,35 (1,06 < OR < 1,71), ?2 = 6,32 e valor de p = 0,0113. Retornando 18 semanas dos períodos demaior prevalência para investigar as causas de contaminação ambiental, identificou-se que os mesesde julho, janeiro e fevereiro, no período 2009 a 2013, tiveram precipitações pluviométricas superioresa 100 mm, o que constitui um fator de dispersão de ovos de Taenia saginata. Os abatedouros comSIM são abastecidos com poucos animais provenientes de pequenas propriedades, principalmentede agricultura familiar. Estas propriedades incrementam a mão de obra especialmente nos meses dejulho, dezembro, janeiro e fevereiro, quando os filhos dos agricultores se encontram em período deférias escolares e ajudam no manejo dos animais e também na agricultura. Eles auxiliam na colheitada soja (janeiro a maio), do milho (dezembro a junho), do fumo (dezembro a fevereiro) e do feijão(outubro a março). Portanto, aumenta a concentração de provável fonte de infecção no campo.No cálculo do índice endêmico da cisticercose bovina por meio do critério do quartil, baseadonos dados retrospectivos do período de 2009 a 2013, o terceiro quartil (zona de alerta) apresentouprevalências esperadas refletindo a descrição acima. Ou seja, além das maiores precipitações emjulho, janeiro e fevereiro, também nesta época identificamos maior concentração de estudantes emférias, representando potenciais fontes de infecção.

Soroprevalência e fatores de risco à infecção por Toxoplasma gondii em gestantes de Pelotas, sul do Brasil / Seroprevalence and risk factors to Toxoplasma gondii infection in pregnant women of Pelotas, south of Brazil

A infecção congênita por Toxoplasma gondii pode causar as formas mais graves da doença em humanos, levando a abortos e malformações fetais. Os objetivos deste estudo foram avaliar a soroprevalência para T. gondii em gestantes e as associações entre essa soropositividade e a exposição a possíveis fatores de risco à infecção. Foi realizado um estudo transversal, com 425 gestantes que realizaram o pré-natal nas Unidades Básicas de Saúde de Pelotas (RS-Brasil), no período de maio a novembro de 2006. A técnica sorológica utilizada para a dosagem de anticorpos foi a quimioluminescência (Dpc® Immulite). A soroprevalência (IgG) entre as gestantes estudadas foi de 54,8% e não foram detectados anticorpos IgM para T. gondii. Constatou-se elevado desconhecimento da doença pelas gestantes entrevistadas, sobretudo quanto às possíveis fontes de infecção. Na análise dos fatores de risco, a soropositividade foi significativamente maior (p<0,05) em gestantes com idade mais elevada, que manuseiam carnes cruas, consomem vegetais crus, carnes cruas ou mal cozidas, leite cru não pasteurizado e têm contato direto com o solo. Através do modelo de regressão logística, essa associação foi confirmada para o consumo de carnes cruas ou mal cozida (OR=1,85) e o contato direto com o solo (OR=2,67). O consumo de água não tratada (OR=0,81), convívio com gatos (OR=0,98) e contato com seus dejetos (OR=0,47) não representaram risco de infecção para a população estudada. Os resultados obtidos indicam a necessidade da implantação de programas educativos com medidas de prevenção primária à infecção por T. gondii nessa comunidade, a fim de reduzir o risco da toxoplasmose congênita.

Prevalência e fatores associados à infecção pelo vírus da diarréia viralbovina na região Sul do Rio Grande do Sul / Prevalence and factors associated with bovine viral diarrhea virus infection in South of Rio Grande do Sul

O presente estudo teve como objetivo estimar a prevalência e determinar os principais fatores associadosà infecção pelo vírus da diarréia viral bovina (BVDV) no rebanho bovino dos municípios de Santa Vitóriado Palmar e Chuí, na região sul do estado do Rio Grande do Sul. Amostras de soro foram submetidas àprova de soroneutralização e, em cada propriedade avaliada, aplicou-se um questionário epidemiológicopara investigar fatores que poderiam estar associados à infecção. As amostras de soro foram coletadasem 85 propriedades, cujos animais apresentavam ou não sinais clínicos de infecção pelo BVDV. Das1.734 amostras de soro analisadas, 1.150 (66,32%) foram positivas com a detecção de bovinossorologicamente positivos em 70 (82,35%) propriedades. Dentre os fatores avaliados, exploração mista,criação extensiva, realização de ordenha mecânica, uso de inseminação artificial ou de inseminaçãoartificial associada à monta natural, uso de piquete de parição e ausência de assistência veterinária,apresentaram significância estatística (P<0,05) associada à soropositividade. Os resultados obtidosdemonstram a expressiva disseminação do BVDV no rebanho bovino dessa região do Rio Grande do Sul.

This study was performed in order to estimate the prevalence of bovine viral diarrhea virus (BVDV), andto determine the main factors related to the prevalence of the infection in cattle of Santa Vitória do Palmarand Chuí counties, in Rio Grande do Sul State. Sera were submitted to the serum neutralization test andan epidemiological questionnaire was filled out in each herd to investigate variables that could beassociated with this infection. The sera samples were collected in 85 farms, with or without clinical signsof BVDV infection. From 1.734 serum samples examined, 1.150 (66.32%) in 70 (82.35%) herds were positive.Variables that were identified as risk factors to seropositivity were mixed (dairy and beef) herds, extensive production, use of mechanical milking, use of artificial insemination or artificial insemination associated with natural service, use of the maternity unit at calving and absence of veterinarian assistance (P<0.05).The results demonstrate the expressive dissemination of the BVDV in cattle of this region in Rio Grande do Sul

Escherichia coli verotoxigênica: isolamento e prevalência em 60 propriedades de bovinos de leite da região de Pelotas, RS, Brasil / Verotoxin-producing Escherichia coli: isolation and prevalence in 60 dairy cattle farms from Pelotas-RS, Brazil

A produção de verotoxinas foi investigada em 1.127 isolamentos de Escherichia coli feitos a partir de 243 bovinos de leite, de água de consumo humano e animal e de amostras de leite de 60 propriedades da bacia leiteira de Pelotas, no período de dezembro de 1999 a dezembro de 2000, com o objetivo de determinar a prevalência de E. coli verotoxigênicas (VTEC) nas propriedades e no rebanho, de detectar a presença de sorotipos ligados a infecções humanas e de identificar, nas propriedades e na região de Pelotas, potenciais fatores de risco de infecção para os animais. A detecção das toxinas em sobrenadante de culturas de E. coli isoladas foi realizada através do ensaio de citotoxicidade em células Vero. VTEC foi isolada em 95 por cento (57/60) das propriedades estudadas, em 49 por cento (119/243) dos animais testados, em 5 por cento (3/60) das amostras de água de consumo humano, em 8,35 por cento (5/60) das amostras de água de consumo animal e em 5 por cento (3/60) das amostras de leite. A prevalência de bovinos infectados em cada propriedade variou de 0 a 100 por cento. Em 2,9 por cento (7/243) dos animais testados, foram isoladas VTEC pertencentes aos sorogrupos O157, O91 e O112, que incluem cepas responsáveis por casos de colite hemorrágica e síndrome urêmica hemolítica em humanos. Fatores de risco de contaminação, como a precipitação pluviométrica, a temperatura, o tamanho da propriedade e a concentração de animais, apresentaram evidências de influenciarem a prevalência de VTEC nos animais. Estes resultados sugerem que o grupo VTEC está amplamente distribuído na bacia leiteira de Pelotas e inclui organismos pertencentes a sorogrupos patogênicos para humanos.

The production of verotoxin was investigated in 1127 Escherichia coli isolated from 243 dairy cattle, water for human and animal consumption, and milk samples from 60 dairy farms from Pelotas-Brazil, from December of 1999 to December of 2000, to determine the prevalence of verotoxigenic E. coli (VTEC) in farms, to detect the presence of serotypes involved in human infections and to identify potential risk factors for animal infection. Vero cell assay was used to detect toxins in culture supernatants from E. coli isolated. VTEC was isolated in 95 percent (57/60) from farms and in 49 percent (119/243) from cattle, 5 percent (3/60) from water of human consumption, in 8.35 percent (5/60) from water animal consumption and 5 percent (3/60) from milk samples. The prevalence of cattle infected for each farm ranged from 0 to 100 percent. VTEC belonging to serogroups O157, O91 and O112, which include strains responsible for cases of hemorrhagic colitis and hemolytic uremic syndrome in humans, were isolated from 7 (2.9 percent) out of 243 cattle. Risk factors for contamination, such as amount of rain, farm size and cattle number, influenced cattle prevalence rate. These results suggest that VTEC is widely distributed among dairy cattle in the region surveyed and includes organisms from serogroups pathogenic for humans.

Evidência do cão como reservatório da leptospirose humana: isolamento de um sorovar, caracterização molecular e utilização em inquérito sorológico

O artigo, através da realização de vários experimentos, indica o cão, como o segundo principal reservatório de leptospirose

Levantamento soroepidemiológico de leptospirose em trabalhadores do serviço de saneamento ambiental em localidade urbana da região sul do Brasil

Levantamento soroepidemiológico de leptospirose em trabalhadores do serviço de saneamento ambiental em localidade urbana da região sul do Brasil.Artigo publicado originalmente na Revista de Saúde Pública da USP

[Evidence of dog as a reservoir for human leptospirosis: a serovar isolation, molecular characterization and its use in a serological survey]. / Evidência do cão como reservatório da leptospirose humana: isolamento de um sorovar, caracterização molecular e utilização em inquérito sorológico.

Canine leptospirosis has been known as Stuttgart disease since 1898, and dogs are considered to be the second principal source of infection in man. The isolation of a pathogenic serovar from dog urine that was diagnosed clinically and laboratorial as having leptospirosis and its utilization to test serological samples of human and canine cases of leptospirosis, has demonstrated its importance to the ecosystem of the southern region of Brazil. The results of the serological microscopic agglutination test indicated that 100% of human serum samples from 12 patients from the serum bank of 2001 at the Center for Control of Zoonoses, that had titers between 25 and 3,200 with the canicola serovar, and 72% of 105 canine serum samples from the same serum bank, also reacted with the new isolate. The mean and median titers of the human serum samples tested with the battery of antigens recommended by WHO was 630 and 100 respectively, and when tested with the isolate it was 1,823 and 400. In the dog sera, the values were respectively 347 and 100 with the battery, and 1,088 and 200 with the isolate.

Evidência do cão como reservatório da leptospirose humana: isolamento de um sorovar, caracterização molecular e utilização em inquérito sorológico / Evidence of dog as a reservoir for human leptospirosis: a serovar isolation, molecular characterization and its use in a serological survey

A leptospirose canina é conhecida como enfermidade de Stuttgard desde 1898, sendo os cães, depois dos roedores, considerados como a segunda principal fonte de infecção para o homem. O isolamento de um sorovar patogênico da urina de um cão, laboratorial e clinicamente identificado como tendo leptospirose, e sua utilização para testar amostras de soro de casos de leptospirose humana e canina, evidenciou a sua importância no ecossistema da região sul do Brasil. Os resultados do teste de soroaglutinação microscópica indicaram que 100 por cento das amostras de soro humano de 12 pacientes do banco de soro de 2001 do Centro de Controle de Zoonoses, que haviam reagido com títulos que variaram de 25 a 3.200 para o sorovar canicola, e 72 por cento das amostras de 105 soros caninos do mesmo banco de soro, também reagiram contra o novo isolado. O título médio e mediana dos soros humanos testados com a bateria de antígenos recomendada pela OMS, foi respectivamente 630 e 100, ao passo que os testados com o isolado foi de 1.823 e 400. Nos soros caninos, os títulos foram respectivamente de 347 e 100 para a bateria e de 1.088 e 200 para o isolado.

Intoxicaçäo estafilocócica em restaurante institucional / Staphylococcal intoxication in a institutional restaurant

Foi investigado um surto de intoxicaçäo alimentar ocorrido em um restaurante institucional. Cinqüenta e seis pessoas, de um total de 88, foram acometidas de vômitos, diarréia, dores abdominais, prostraçäo, febre e cefaléia após ingerirem uma refeiçäo composta de sanduíche de galinha, refresco de laranja e pudim de leite. Os sintomas apareceram entre uma hora e meia e 12 horas após a ingestäo da refeiçäo e duraram 24 a 36 horas. As taxas de ataque específico foram de 64 por cento para o sanduíche de galinha, de 61 por cento para o refresco de laranja e de 60 por cento para o pudim. A contagem de Staphylococcus aureus secretores de enterotoxina A no sanduíche de galinha foi de 2 X 10(8)UFC.g-1. Estes resultados, juntamente com os obtidos nos questionários aplicados às pessoas que ficaram doentes, forneceram provas circunstanciais que permitiram concluir que ocorreu uma intoxicaçäo alimentar provocada pelo sanduíche de galinha contaminado com enterotoxina A de Staphylococcus aureus.

Monoclonal antibodies against an outer membrane protein from pathogenic Leptospira

Foram obtidos dois hibridomas secretores de anticorpos monoclonais (MAbs) que reagem com uma lipoproteína (LipL32) da membrana externa de leptospiras patogênicas. Para a produção dos hibridomas, células do baço de camundongos BALB/c, imunizados com LipL32 recombinante (rLipL32), foram fusionadas com células SP2/O-Ag14, selecionadas em meio HAT e testadas em ELISA indireto. Um dos MAbs secretados pelos hibridomas é do isotipo IgG2b e o outro do isotipo IgM. A especificidade dos MAbs foi confirmada em ELISA indireto e immunoblotting usando rLipL32 purificada, Escherichia coli (E. coli) expressando LipL32 e sorovares patogênicos e saprófitas. Os dois MAbs reagiram com a maioria dos sorovares patogênicos e não reagiram com sorovares saprófitas. Os MAbs possuem potencial para uso em testes de diagnóstico de leptospirose.

Influence of temperature, incubation time, antigen density and age of the culture in agglutinability of leptospires

Na leptospirose, o teste de soroaglutinação microscópica (MAT) é a base do diagnóstico sorológico, sendo amplamente usado. Em nosso estudo, o MAT foi aplicado para avaliar a influência da temperatura, tempo de incubação, densidade do antígeno, a idade da cultura na aglutinabilidade das leptospiras e a interferência desses fatores na interpretação do diagnóstico. Três amostras de soro com títulos de 100, 800 e 25600 para o sorovar tande (isolado local), do sorogrupo canicola foram utilizadas com combinações diferentes entre os quatro fatores. Houve uma significante relação entre todos os fatores principalmente a densidade do antígeno e a idade da cultura.

Leptospirosis diagnosis using Nested-PCR

A leptospirose constitui um problema sanitário de importância mundial. Esta doença caracteriza-se por apresentar sintomas muito parecidos com os de outras doenças como a dengue e a gripe e, clinicamente é difícil de distingui-las. Técnicas de diagnóstico da leptospirose atualmente disponíveis apresentam baixa sensibilidade e ou especificidade. Por isso, tem havido um grande esforço no sentido de desenvolver testes rápidos e eficientes, baseados em técnicas de biologia molecular. Este trabalho objetivou a avaliação e otimização do Nested-PCR, para o diagnóstico de leptospirose. Para isso foi desenhado um par de primers que amplifica uma região de 264 pb do gene LipL32. A sensibilidade e especificidade do teste foram avaliadas utilizando 7 sorovares saprófitas e 35 sorovares patogênicos. Este PCR mostrou-se específico para leptospiras patogênicas, porém a sensibilidade não foi muito alta. Com o objetivo de melhorar a sensibilidade do teste , foi desenhado outro par de primers que amplifica uma região de 183 pb do gene LipL32, interna a de 264 pb para a realização do Nested-PCR. Nesta reação foi utilizado como DNA molde o produto da primeira amplificação. O Nested-PCR mostrou-se mais sensível que o PCR normal, pois foi capaz de detectar um baixo número de células bacterianas.

Monoclonal antibodies against an outer membrane protein from pathogenic Leptospira

Two hybridomas secreting monoclonal antibodies (MAbs) that react with a lipoprotein (LipL32) of the outer membrane of pathogenic Leptospira were obtained. For hybridoma production, spleen cells from BALB/c mice imunized with recombinant LipL32 (rLipL32) were fused to SP2/O-Ag14 cells, selected in HAT medium and screened in an indirect ELISA. One MAb produced was of the IgG2b isotype and the other was an IgM. MAbs specificity was confirmed by indirect ELISA and immunoblotting using purified rLipL32 and whole-cell antigen preparations from Escherichia coli (E. coli) expressing LipL32 and from pathogenic and non-pathogenic serovars. Both Mabs reacted with most of the pathogenic serovars tested and none reacted with non-pathogenic Leptospira. The MAbs described have potential for use in diagnostic tests for leptospirosis.

Foram obtidos dois hibridomas secretores de anticorpos monoclonais (MAbs) que reagem com uma lipoproteína (LipL32) da membrana externa de leptospiras patogênicas. Para a produção dos hibridomas, células do baço de camundongos BALB/c, imunizados com LipL32 recombinante (rLipL32), foram fusionadas com células SP2/O-Ag14, selecionadas em meio HAT e testadas em ELISA indireto. Um dos MAbs secretados pelos hibridomas é do isotipo IgG2b e o outro do isotipo IgM. A especificidade dos MAbs foi confirmada em ELISA indireto e immunoblotting usando rLipL32 purificada, Escherichia coli (E. coli) expressando LipL32 e sorovares patogênicos e saprófitas. Os dois MAbs reagiram com a maioria dos sorovares patogênicos e não reagiram com sorovares saprófitas. Os MAbs possuem potencial para uso em testes de diagnóstico de leptospirose.

Influence of temperature, incubation time, antigen density and age of the culture in agglutinability of leptospires

In leptospirosis, the Microscopic Agglutination Test (MAT) is the basis of serological diagnosis and the most widely used. In our study, the MAT was applied to evaluate the influence of temperature, incubation time, antigen density and age of the culture in the agglutinability of Leptospires and the interference of these factors in diagnosis. Three serum samples with titers of 100, 800 and 25.600 to the serovar tande (local isolate) of canicola serogroup were used with different combinations among the four factors. There was a significant relation among all factors, specially between the antigen density and age of the culture.

Na leptospirose, o teste de soroaglutinação microscópica (MAT) é a base do diagnóstico sorológico, sendo amplamente usado. Em nosso estudo, o MAT foi aplicado para avaliar a influência da temperatura, tempo de incubação, densidade do antígeno, a idade da cultura na aglutinabilidade das leptospiras e a interferência desses fatores na interpretação do diagnóstico. Três amostras de soro com títulos de 100, 800 e 25600 para o sorovar tande (isolado local), do sorogrupo canicola foram utilizadas com combinações diferentes entre os quatro fatores. Houve uma significante relação entre todos os fatores principalmente a densidade do antígeno e a idade da cultura.

Leptospirosis diagnosis using Nested-PCR

Leptospirosis is a worldwide sanitary problem. Its clinical signs resemble that of other diseases like Dengue and Flu, and it is difficult to distinguish between them. Currently available diagnostic methods shown low sensitivity and specificity. Efforts have been made to develop simpler, faster and more efficient diagnostic methods. The aim of this work was to evaluate and optimize a Nested-PCR method for diagnosis of leptospirosis. Primers were designed to amplify a 264 bp region within the LipL32 gene. The sensitivity and specificity of the assay was evaluated using seven saprophytic serovars and 35 pathogenic serovars. This technique showed to be very specific for pathogenic serovars, however it lacked sensitivity. In order to enhance the sensitivity, another primer pair was designed which amplify a 183 bp region within the 264 bp region in lipL32 gene, and used in a Nested-PCR assay. This approach was much more sensitive than traditional PCR.

A leptospirose constitui um problema sanitário de importância mundial. Esta doença caracteriza-se por apresentar sintomas muito parecidos com os de outras doenças como a dengue e a gripe e, clinicamente é difícil de distingui-las. Técnicas de diagnóstico da leptospirose atualmente disponíveis apresentam baixa sensibilidade e ou especificidade. Por isso, tem havido um grande esforço no sentido de desenvolver testes rápidos e eficientes, baseados em técnicas de biologia molecular. Este trabalho objetivou a avaliação e otimização do Nested-PCR, para o diagnóstico de leptospirose. Para isso foi desenhado um par de primers que amplifica uma região de 264 pb do gene LipL32. A sensibilidade e especificidade do teste foram avaliadas utilizando 7 sorovares saprófitas e 35 sorovares patogênicos. Este PCR mostrou-se específico para leptospiras patogênicas, porém a sensibilidade não foi muito alta. Com o objetivo de melhorar a sensibilidade do teste , foi desenhado outro par de primers que amplifica uma região de 183 pb do gene LipL32, interna a de 264 pb para a realização do Nested-PCR. Nesta reação foi utilizado como DNA molde o produto da primeira amplificação. O Nested-PCR mostrou-se mais sensível que o PCR normal, pois foi capaz de detectar um baixo número de células bacterianas.

Fatores de risco associados à presença de anticorpos antileptospira em trabalhadores do serviço de saneamento ambiental / Risk factors associated to the presence of antibodies anti-leptospira in environmental sanitation workers

Realizou-se um estudo soroepidemiológico com trabalhadores do Saneamento Ambiental de Pelotas-RS para estimar a freqüência e investigar fatores de risco associados à infecçäo por leptospira. A partir do resultado sorológico, selecionaram-se 2 grupos de trabalhadores, divididos em um grupo de 34 indivíduos com sorologia positiva, casos; e um grupo de 115 com sorologia negativa, controles. Através de um questionário padronizado, coletaram-se informaçöes sobre variáveis demográficas, ocupacionais, comportamentais e ambientais nos locais de trabalho e de moradia dos indivíduos. A freqüência de aglutininas anti-leptospira foi igual a 10,36 por cento (n=386). Os fatores de risco detectados foram: local geográfico de trabalho; presença de esgotos a céu aberto, criaçäo de suínos e presença de 3-4 animais no local de moradia e, como fator de proteçäo, a presença de sanitário interno à moradia. Essas informaçöes säo úteis para prevenir a leptospirose nessa categoria de trabalhadores.

Aglutininas anti-leptospíricas em cäes na área de influência do Centro de Controle de Zoonoses, Pelotas, RS, Brasil, no ano de 1995 / Leptospiral agglutinins in dogs, in the influence area of the Center for Control of Zoonoses, Pelotas City, RS, Brazil, 1995

Durante o ano de 1995, usando a técnica de soroaglutinaçäo microscópia com antígenos vivos, para diagnóstico de leptospirose, foram examinadas 425 amostras sangüíneas provenientes de cäes da área de influência do Centro de Controle de Zoonoses de Pelotas. Foram detectadas 148 (34,8 porcento) amostras positivas, com título igual ou maior a 1:100, para os seguintes sorovares; L. canícula (58,1 porcento), L. icterohaemorrhagiae (20,9 porcento), L. copenhageni (11,4 porcento), L. grippotyphosa e L. castellonis (2.7 porcento), L. andamana, L. autumnalis e L. pyrogenes (1,4 porcento). Houve maior ocorrência da infecçäo nos meses de março, agosto, setembro, outubro e novembro, coincidindo com o registro de temperaturas mais elevadas e maiores precipitaçöes pluviométricas, um mês antes de cada surto, caracterizando que estes dois fatores säo importantes para a manutençäo das leptospiras a nível ambiental.

Levantamento soroepidemiológico de leptospirose em trabalhadores do serviço de saneamento ambiental em localidade urbana da regiäo sul do Brasil / Serological survey of leptospirosis among environmental sanitation workers in an urban locality in southern Brazil

A pesquisa de aglutininas anti-Leptospira, pela técnica de soroaglutinaçäo microscópica, em soros de trabalhadores dos serviços de águas, bueiros e galerias, esgotos, coleta de lixo e limpeza pública, do Município de Pelotas, RS, Brasil, revelou 10,4 por cento de reagentes a um ou mais sorovares; näo houve diferenças significantes entre as proporçöes de reagentes de cada um dos setores de trabalho. Foram identificados 12 sorovares diferentes; castelonis e australis, apesar de mais freqüentes, näo apresentaram diferenças estatisticamente significantes com os demais. Constatou-se que 86,9 por cento das amostras apresentavam títulos aglutinantes compreendidos entre 100 e 400; as proporçöes de soros com títulos iguais a 100 e 400 foram superiores às dos 800, 1.600 e 3.200 (p<0,05)